流式細胞術在自身免疫疾病中的應用

自身免疫性疾病（autoimmune disease，AID）是指由于某些原因造成免疫系統對自身成分的免疫耐受減低或破壞，致使自身抗體或/和致敏淋巴細胞損傷自身器官組織而引起的疾病，表現為相應組織器官的功能障礙。臨床上常將AID分為器官特異性和全身性（或系統性）兩類。

• 器官特異性常見的有：強直性脊柱炎、I型糖尿病、炎癥性腸病、多發性硬化癥、自身免疫性肝炎等，所謂的器官特異性都是相對的，這些疾病也常會伴發多個組織、器官的損傷；

• 系統性常見的有：系統性紅斑狼瘡SLE、硬皮病、干燥綜合癥、類風濕性關節炎RA等。

自身免疫疾病的主要藥物治療還是依靠激素和生物制劑通過阻斷關鍵炎癥性細胞因子或細胞表面分子，如常見的腫瘤壞死因子-α (TNF-α) 抑制劑（阿達木單抗）、白細胞介素-6受體 ( IL-6R) 抑制劑、選擇性T細胞共刺激調節劑以及其他生物制劑如CD20靶向藥物（利妥昔單抗）等。

免疫反應調節異常TH細胞和T抑制細胞（TS）對自身反應性B細胞的調控作用十分重要，當Ts細胞功能過低或TH細胞功能過度時，則可有多量自身抗體形成，出現過量的自身抗體，會誘發自身免疫性疾病。

流式細胞術在自身免疫相關疾病的精準診治中發揮重要作用，通過對免疫細胞的檢測來評估機體整體的免疫狀態和功能，檢測疾病發病和治療相關的靶點從而為早期診治、個性化治療、指導用藥劑量和療程、病情和預后監測提供重要指標和參考依據。

TBNK細胞是外周血T淋巴細胞、B淋巴細胞和NK細胞亞群的簡稱，這些細胞是機體免疫功能的重要指標之一，主要用于免疫系統疾病及免疫相關疾病診斷和治療的臨床監測。自身免疫疾病發病、進展以及治療過程中常伴隨著 TBNK淋巴細胞數量、比例和功能上的變化。TBNK淋巴細胞亞群檢測能反映機體當前的免疫狀態，輔助疾病診斷，同時對分析疾病的發病機制、B細胞清除療效評估、副作用及預后監測提供參考依據。

HLA-B27屬于I型MHC抗原分子，為HLA-B類分子，表達于機體所有有核細胞表面，其中淋巴細胞表面含量豐富。HLA-B27與許多疾病呈強相關，尤其是強直性脊柱炎 (Ankylosing Spondylitis, AS) ，此外還有銀屑病關節炎，Reiter’s綜合征，反應性關節炎，炎癥性腸病性關節炎等。

在2019年發布的《中軸型脊柱關節炎診斷和治療的專家共識》中提到，HLA-B27陽性已列為中軸型脊柱關節炎 (axial SpA，ax-SpA) （包括強直性脊柱炎 (ankylosing spondylitis，AS)）的診斷標準之一。AS早期其發病隱匿，癥狀多樣，腰腿痛及晨僵癥狀與多種疾病類似，容易誤診。因此HLA-B27檢測對AS進行早期診斷、治療就有非常重要的意義

流式細胞儀使用FSC/SSC圈定淋巴細胞，檢測淋巴細胞表面HLA-B27抗原表達強度和百分比，同時檢測HLA-B7排除同屬交叉反應的干擾。

T淋巴細胞起源于骨髓，然后轉移到胸腺中發育成熟，是機體免疫細胞中數目最多、功能最復雜的一類細胞。

流式細胞分析儀FCM根據淋巴細胞表面標志的不同來檢測T淋巴細胞亞群：初始T細胞（CD45RA+CD27+）、中央記憶T細胞（CD45RA-CD27+）、效應記憶T細胞（CD45RA-CD27-）、終末分化效應記憶T細胞（CD45RA+CD27-）、活化亞群（CD38+）、衰老耗竭亞群（PD1,CD57,CD28）等。通過T淋巴細胞亞群的監測可以了解在不同疾病狀態下患者的細胞免疫功能狀態，已經廣泛在腫瘤、自體免疫、感染性疾病中,輔助臨床診斷、幫助了解發病機理、判斷預后和指導臨床治療。若外周血中T細胞總數或不同T細胞亞群的絕對數和比值發生改變,可視為免疫異常。

B淋巴細胞是在骨髓內發育成熟的細胞，其表面分化抗原十分復雜，通過識別抗原、與免疫細胞和免疫分子相互作用，這些表面抗原在B細胞的增殖分化和功能發揮中起著重要的調節作用。根據表面抗原表達量的不同，B細胞可分成不同亞群。大部分發揮效應功能的B細胞在體內存活的時間較短，僅數天至數周，但其記憶細胞在體內可長期存在。異常B細胞識別自身抗原，并分泌攻擊自身組分的抗體時，可能導致自身免疫病。與B細胞異常相關的自身免疫病包括硬皮病、多發性硬化、系統性紅斑狼瘡、1型糖尿病和類風濕性關節炎等。

B淋巴細胞精細亞群檢測項目可以全面分析B淋巴細胞的后期成熟階段，從而幫助我們準確了解自身的體液免疫狀態，可以更好地指導臨床治療，對病情判斷和臨床治療和觀察是有一定價值的參考指標。