BLU新視野 | Jurkat細胞精準計數為何屢成瓶頸？

點擊次數：312 更新時間：2025-08-22

Jurkat細胞是人急性T淋巴細胞白血病（T-ALL）來源的懸浮細胞系，1970年代由Schneider建立。因保留了完整的T細胞受體（TCR）-CD3復合體及下游信號分子，它成為全球研究T細胞活化、信號轉導、細胞因子分泌以及病毒轉導效率的“黃金模型"。

Jurkat細胞直徑約14–16 μm，呈懸浮生長，極易自發或剪切誘導，聚集成團；活細胞邊緣折光性強，死細胞則迅速皺縮，臺盼藍染色顯示為一深一淺，肉眼判斷的主觀誤差較大，計數重復性低。此外，其核型復雜（假三倍體），在長期傳代中可能出現亞克隆漂移，因此實驗前需同步檢定細胞活率、濃度及關鍵表面標記（如CD3、CD28）。

對于Jurkat細胞的精準計數一直是個難題。傳統技術方法如血球計數板，只能選取部分視野，且人眼計數有限，因此，手動計數的誤差通常＞15%，這對后續實驗的結果以及實驗整體的可重復性都帶來了極大的影響。

為了應對這一計數難題，我們使用了Beckman Coulter Vi-CELL BLU細胞活率分析儀，調整并測試了Jurkat細胞計數的最佳參數，快速得到了較為精準，可重復的計數結果。

實驗

在使用Beckman Coulter Vi-CELL BLU細胞活率分析儀時，大多數細胞可以使用默認的儀器設置進行分析。在某些情況下，某些細胞系可能需要修改這些分析參數。Vi-CELL BLU自帶的軟件允許用戶直觀且輕松地選擇最佳的儀器設置，從而確保準確的結果。用于Jurkat細胞分析的儀器設置如下（圖1）。

圖1：用于Jurkat細胞計數時，Beckman Coulter Vi-CELL BLU細胞活率分析儀的參數設置

結果

Vi-CELL BLU細胞活率分析儀報告的結果如圖2所示。細胞活率百分比和總Jurkat細胞濃度分別為91.5%和8.99 x 10^{^6} cells/mL。Vi-CELL BLU細胞活率分析儀還報告活細胞濃度、平均細胞直徑、大小分布和平均細胞圓形度。每次測量技術的細胞圖像也可以存檔，以供將來重新分析。

圖2：活細胞用綠色圓圈表示，非活細胞用紅色圓圈表示

結論

對于高密度、易聚團或形態不均一的懸浮細胞系，Beckman Coulter Vi-CELL BLU細胞活率分析儀能夠消除人為偏差，提升數據一致性并消除手動計數中固有的主觀性，并且拍照多個視野，與手動計數相比，有≥10?的樣本量來降低統計誤差。此外，每次計數的結果都會輸出可追溯圖像，滿足GLP要求。