流式細(xì)胞儀的應(yīng)用分類都有哪些

一、免疫表型分析  

1993年在波士頓召開的人類白細(xì)胞分化抗原會(huì)議(leukocytedifferentiationantigen,HLDA)  

將CD抗原(clusterofdifferentiation)分為T細(xì)胞、B細(xì)胞、髓細(xì)胞、血小板、內(nèi)皮細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞、活化抗原、黏附因子、細(xì)胞因子和細(xì)胞因子受體等九個(gè)組，確立了48種新抗原。  

1996年11月在神戶召開的第六屆HLDA會(huì)議上，又有30多種新抗原被確認(rèn)，CD編號(hào)已達(dá)166個(gè)，CD抗原有197種。2000年7月，第七屆人類白細(xì)胞分化抗原會(huì)議的召開，CD抗原已達(dá)247種。CD系列在免疫學(xué)中常被用于:(1)CD抗原的基因克隆，新CD抗原及新配體的發(fā)現(xiàn);(2)CD抗原功能與結(jié)構(gòu)的關(guān)系;(3)細(xì)胞激活途徑和膜信號(hào)的傳遞;(4)細(xì)胞分化過程中的調(diào)控;(5)細(xì)胞亞群的功能。  

免疫表型分析的應(yīng)用  

1.檢測淋巴細(xì)胞亞群，監(jiān)測細(xì)胞免疫狀態(tài)(淋巴細(xì)胞是機(jī)體免疫系統(tǒng)功能重要的大細(xì)胞群，在免疫應(yīng)答過程中，末梢血淋巴細(xì)胞發(fā)育分化成為功能不同的亞群。當(dāng)亞群的數(shù)量和功能  

發(fā)生異常時(shí)，就能導(dǎo)致機(jī)體免疫紊亂并產(chǎn)生病理變化。FCM可以同時(shí)檢測一種或幾種淋巴細(xì)胞表面抗原，將不同的淋巴細(xì)胞亞群區(qū)分開來，并計(jì)算出它們相互間的比例，通過對病人淋巴細(xì)胞各亞群數(shù)量的測定來監(jiān)控病人的免疫狀態(tài)，并指導(dǎo)治療)。  

2.白血病/淋巴瘤免疫分型;  

3.HLA組織配型及HLA與某些疾病的關(guān)系;  

4.干祖細(xì)胞的定量及成分分析;  

5.粘附分子;TCR多態(tài)性檢測;腫瘤癌基因及抑癌基因蛋白產(chǎn)物的檢測;細(xì)胞內(nèi)酶;耐藥蛋白的分析等等;  

6.疾病診斷:為疾病診斷提供直接的或支持診斷的依據(jù);  

7.免疫調(diào)節(jié)：細(xì)胞因子/受體的相互作用、共刺激分子受體/配體的相互作用;  

8.發(fā)病機(jī)理：腫瘤的發(fā)病與機(jī)體的免疫力低下、以及信號(hào)傳遞障礙有關(guān);  

9.藥物/疫苗效果的評價(jià)：腫瘤生物治療的時(shí)機(jī)選擇、以及效果的監(jiān)測;  

10.免疫狀態(tài)評價(jià)：移植、放化療等。  

二、DNA含量及細(xì)胞周期分析  

細(xì)胞周期分析:在細(xì)胞周期(G0，G1，S，G2，M)的各個(gè)時(shí)期，DNA的含量隨各時(shí)相呈現(xiàn)出周期性的變化。通過核酸染料標(biāo)記DNA，并由流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析，可以得到細(xì)胞各個(gè)時(shí)期的分布狀態(tài)，計(jì)算出G0/G1%，S%及G2/M%。了解細(xì)胞的周期分布及細(xì)胞的增殖活性。也可利用細(xì)胞周期蛋白(CYCLIN)、Ki67、核增殖抗原(PCNA)等，對細(xì)胞周期進(jìn)行的分期：G0、G1、S、G2、M.應(yīng)用于：腫瘤的早期診斷、腫瘤的良惡性判斷、觀察細(xì)胞的增殖狀態(tài)及周期分布和療效監(jiān)測。  

三、定量分析  

1.檢測細(xì)胞特異性標(biāo)記物：FCM不但可以定性分析標(biāo)記物，而且可以進(jìn)行定量。用標(biāo)記已知數(shù)量的熒光素分子的標(biāo)準(zhǔn)微球作參照，可以計(jì)算出每個(gè)細(xì)胞抗原定簇的個(gè)數(shù);  

2.CD4計(jì)數(shù);  

3.CD34**計(jì)數(shù);  

4.可溶性物質(zhì)(如細(xì)胞因子)的高通量定量檢測。  

四、細(xì)胞功能分析  

1.吞噬功能試驗(yàn);  

2.氧爆發(fā)試驗(yàn);  

3.根據(jù)T淋巴細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的不同將CD4+或CD8+分為介導(dǎo)細(xì)胞免疫的I型細(xì)胞和介導(dǎo)體液免疫的II型細(xì)胞;  

4.藥物泵的功能檢測;  

5.NK細(xì)胞的腫瘤殺傷活性檢測;  

6.血小板的粘附,聚集功能檢測。  

五、細(xì)胞凋亡研究  

1.鑒別凋亡與壞死;  

2.測定凋亡率;  

3.研究凋亡觸發(fā)機(jī)制。  

六、其它  

1.微生物快速鑒定及藥敏;  

2.分子流式細(xì)胞術(shù)，利用寡核苷酸為探針，檢測端粒酶的長度;  

3.運(yùn)用抗體進(jìn)行血小板抗原基因型分型;  

4.利用GFP或YFP為探針檢測基因轉(zhuǎn)染;  

5.死、活細(xì)胞鑒定等等。